1、操作前應將本次操作所需的全部物品移入生物安全柜，避免雙臂頻繁穿過氣幕破壞氣流;并且在移入前用75%酒精擦拭表面消毒，以去除污染。

2、打開風機5～10分鐘，待柜內(nèi)空氣凈化并氣流穩(wěn)定后再進行實驗操作。將雙臂緩緩伸入安全柜內(nèi)，至少靜止1分鐘，使柜內(nèi)氣流穩(wěn)定后再進行操作。

3、安全柜內(nèi)不放與本次實驗無關的物品。柜內(nèi)物品擺放應做到清潔區(qū)、半污染區(qū)與污染區(qū)基本分開，操作過程中物品取用方便，且三區(qū)之間無交叉。物品應盡量靠后放置，但不得擋住氣道口，以免干擾氣流正常流動。

4、操作時應按照從清潔區(qū)到污染區(qū)進行，以避免交叉污染。為防可能濺出的液滴，可在臺面上鋪*用消毒劑浸泡過的毛巾或紗布，但不能覆蓋住安全柜格柵。

5、生物安全柜柜內(nèi)操作期間，嚴禁使用酒精燈等明火，以避免產(chǎn)生的熱量產(chǎn)生氣流，干擾柜內(nèi)氣流穩(wěn)定;且明火可能損壞HEPA濾器。

6、工作時盡量減少背后人員走動以及快速開關房門，以防止安全柜內(nèi)氣流不穩(wěn)定。

7、在實驗操作時，不可打開玻璃視窗，應保證操作者臉部在工作窗口之上。在柜內(nèi)操作時動作應輕柔、舒緩，防止影響柜內(nèi)氣流。

8、安全柜應定期進行檢測與保養(yǎng)，以保證其正常工作。工作中*旦發(fā)現(xiàn)安全柜工作異常，應立即停止工作，采取相應處理措施，并通知相關人員。

9、工作完成后，關閉玻璃窗，保持風機繼續(xù)運轉10～15分鐘，同時打開紫外燈，照射30分鐘。（在紫外滅菌時要關閉通風;紫外光對人體有損害，注意個人保護。）

10、二級生物安全柜應定期進行清潔消毒，柜內(nèi)臺面污染物可在工作完成且紫外燈消毒后用2%的84消毒液擦拭。柜體外表面則應每天用1%的84消毒液擦拭。

11、生物安全柜柜內(nèi)使用的物品應在消毒后再取出，以防止將病原微生物帶出而污染環(huán)境。